L’un d’eux est similaire au papier de test à l’or colloïdal couramment utilisé dans les tests de dépistage du virus de la grippe.
Le papier test à l'or colloïdal utilise une forme colloïdale d'or pour marquer les biomacromolécules. Il est ensuite fixé sur un papier test en PVC, percé d'un trou pour l'échantillon, puis défini entre une ligne de détection et une ligne de contrôle qualité. L'échantillon est ensuite déposé dans ce trou. Ensuite, quelques gouttes de milieu liquide sont ajoutées et le liquide est déposé sur le tampon absorbant situé à l'autre extrémité du papier test. La chromatographie est effectuée sur le papier test, généralement pendant 10 à 15 minutes. Après la réaction immunitaire, l'agrégation d'or colloïdal est visible. La présence d'une bande rouge à l'œil nu permet de connaître le résultat du test.
Actuellement, deux types de bandelettes de test à l'or colloïdal ont été commercialisées et signalées pour le nouveau coronavirus. L'une d'elles permet de détecter l'antigène du nouveau coronavirus.
Cette méthode utilise la méthode du sandwich à double anticorps, c'est-à-dire que pour un même antigène, deux anticorps sont présents sur le papier test, mais à des emplacements différents. L'anticorps marqué à l'or colloïdal est l'un des anticorps dirigés contre l'antigène, sur le support de liaison du papier test.
Par exemple, des prélèvements de gorge, des écouvillons nasaux et des échantillons de liquide de lavage alvéolaire sont versés goutte à goutte dans l'orifice de prélèvement, puis quelques gouttes de milieu de culture sont ajoutées. Si un antigène viral spécifique est présent dans l'échantillon clinique, il se lie à l'or du tampon. Reconnu par l'anticorps cible, un complexe antigène-anticorps se forme. À ce stade, l'écoulement se poursuit en direction du tampon absorbant. Sur la ligne de détection, un autre anticorps dirigé contre l'antigène est présent. L'épitope reconnu par cet anticorps est différent de celui de l'anticorps marqué à l'or ; le même antigène peut donc être affecté simultanément par ces deux anticorps. Identifié. À ce stade, une partie de l'anticorps marqué à l'or est piégée sur la ligne de détection, ce qui entraîne le développement de la couleur sur cette ligne.
Bien sûr, la quantité d'anticorps marqués à l'or est excédentaire ; elle sera donc non seulement interceptée au niveau de la ligne de détection, mais continuera de s'écouler vers le tampon absorbant. À ce stade, une ligne de contrôle qualité est présente. Sur cette ligne se trouvent des anticorps spécifiquement dirigés contre les anticorps marqués à l'or (c'est-à-dire des anti-anticorps, qui sont essentiellement des anticorps, mais dont l'antigène est également reconnu). La ligne de contrôle qualité étant très performante pour reconnaître les anticorps marqués à l'or, elle sera forcément colorée. C'est également le principe du contrôle qualité. Si cette ligne n'est pas colorée, le résultat du test est invalide.
Par conséquent, le jugement du négatif et du positif est très simple, les deux lignes sont colorées en positif ; seule la ligne de contrôle de qualité est colorée en négatif ; les autres cas sont des expériences invalides.
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Test antigénique Covid à l'or colloïdal
peut être utilisé pour le dépistage précoce de l’infection et constitue un complément efficace à la détection des acides nucléiques (PCR).
La méthode ci-dessus est la méthode sandwich à double anticorps pour la détection des antigènes, et la seconde consiste à détecter les anticorps IgM spécifiques au nouveau coronavirus dans le sang du patient. Voici le papier test à l'or colloïdal pour la méthode de capture des IgM.
Tout d’abord, nous devons comprendre la loi de la réponse des anticorps humains.
Lorsque le corps humain est exposé à des antigènes étrangers, l'anticorps IgM (Ig étant le terme anglais pour « immunoglobuline ») est le premier produit, mais il doit être produit environ une semaine après l'exposition à un agent pathogène. Par conséquent, en termes de délai de détection, il est moins performant que l'acide nucléique. Le test est rapide.
L'IgM est en réalité la forme sécrétée du récepteur des cellules B (BCR) à la surface des lymphocytes B. Il s'agit d'une patrouille préparée à l'avance pendant le développement et la maturité du corps humain, mais équivalente à une recrue, elle n'a pas encore réellement vu l'ennemi. Une fois l'antigène reconnu par l'IgM, les cellules B qui produisent ces IgM pénètrent dans le ganglion lymphatique, où elles sont entraînées avec l'aide des cellules présentatrices d'antigènes (APC) (principalement des cellules dendritiques) et des lymphocytes T auxiliaires dont l'hostilité a été analysée. Le saut qualitatif de l'ennemi : les cellules B elles-mêmes ont évolué, ce qui équivaut à un combattant de niveau 1 en Civ devenant un combattant de niveau 6. Le résultat de l'évolution est la différenciation des cellules B en plasmocytes, qui peuvent être sécrétés en grandes quantités. Les anticorps, dont l'affinité est bien supérieure à celle des IgM, sont les IgG. Les IgG subsistent longtemps dans l'organisme, parfois même des décennies. Cependant, les IgM n'apparaissent qu'à l'arrivée du pathogène et persistent environ une semaine. Elles peuvent donc être utilisées pour indiquer si l'organisme est en phase d'infection aiguë.
Après avoir compris les règles de réponse des anticorps du corps, nous savons que si les anticorps IgM contre le nouveau coronavirus peuvent être détectés dans le sang humain, alors un diagnostic clinique peut être établi.
Le principe du papier test à l'or colloïdal de la méthode de capture IgM est bien compris.
La mise en page du test est toujours la même, mais tout est différent à chaque endroit.
Le tampon d'échantillon est arrosé d'échantillons de sang (sérum), susceptibles de contenir des anticorps IgM contre le nouveau coronavirus, ainsi que l'antigène marqué à l'or, réservé au tampon de liaison. Cet antigène est une protéine du nouveau coronavirus (exprimée de manière recombinante in vitro). Ainsi, l'IgM se lie à cet antigène et transporte l'or colloïdal. La ligne de détection est positionnée sur l'anticorps dirigé contre l'IgM humaine. Ainsi, si l'échantillon sanguin contient des IgM, une partie de celles-ci sera piégée par l'anticorps à cet endroit. Cependant, si ces IgM ne reconnaissent pas l'antigène du coronavirus marqué à l'or au tampon de liaison, le test ne se colorera pas. Tel est le principe de la ligne de détection.
Pour la ligne de contrôle qualité, l'anticorps préparé en laboratoire est dirigé contre l'antigène marqué à l'or au niveau du point de liaison. Par conséquent, quelle que soit la présence d'IgM spécifiques dans l'échantillon, l'ajout du milieu de culture permettra de capturer l'antigène marqué à l'or au niveau du point de liaison, ce qui colorera la ligne de contrôle qualité. Ce contrôle qualité est aussi simple que décrit ci-dessus : il dure environ 15 minutes et peut être évalué grâce au rendu des couleurs des deux lignes.
Après l’introduction du principe, le plus grand avantage de l’or colloïdal est qu’il est rapide et pratique.
Cependant, les défauts sont également évidents : le débit est faible et la précision du test dépend fortement de la spécificité de l'anticorps. Si l'anticorps est de mauvaise qualité, il est facile de provoquer des réactions croisées et d'entraîner des erreurs de jugement. De plus, la production d'IgM est postérieure à la réplication du virus, de sorte que la fenêtre de détection est moins performante que celle de la détection des acides nucléiques.
